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免疫熒光技術(shù)的具體操作步驟!你的操作正確嗎?

更新時(shí)間:2022-09-08 00:00:00       點(diǎn)擊次數(shù):4002

       免疫熒光(immunofluorescence technic)Coons等于1941年首次采用熒光素進(jìn)行標(biāo)記而獲得成功。這種以熒光物質(zhì)標(biāo)記抗體而進(jìn)行抗原定位的技術(shù)稱為熒光抗體技術(shù)(fluorescentantibodytechnique)?!∮脽晒饪贵w示蹤或檢查相應(yīng)抗原的方法稱熒光抗體法;用已知的熒光抗原標(biāo)記物示蹤或檢查相應(yīng)抗體的方法稱熒光抗原法。這兩種方法總稱免疫熒光技術(shù),因?yàn)闊晒馍夭坏芘c抗體球蛋白結(jié)合,用于檢測(cè)或定位各種抗原,也可以與其他蛋白質(zhì)結(jié)合,用于檢測(cè)或定位抗體,但是在實(shí)際工作中熒光抗原技術(shù)很少應(yīng)用,所以人們習(xí)慣稱為熒光抗體技術(shù),或稱為免疫熒光技術(shù)。以熒光抗體方法較常用。用免疫熒光技術(shù)顯示和檢查細(xì)胞或組織內(nèi)抗原或半抗原物質(zhì)等方法稱為免疫熒光細(xì)胞(或組織)化學(xué)技術(shù)。


操作方法:


1首先,免疫熒光法 ,是預(yù)先將熒光素標(biāo)記在抗體上,再與涂片、切片上或細(xì)胞懸液中的抗原進(jìn)行反應(yīng)。借助于交光顯微鏡能夠觀察,是否存在相應(yīng)的抗原,并確定相應(yīng)的位置。用該方法來檢測(cè)斑節(jié)對(duì)蝦排準(zhǔn)物所存在的包體。病毒包酒體在熒光顯微鏡下綠色熒光或樓紅色。


2然后,免疫熒光法需要特殊設(shè)備,不易做定量分析,而且對(duì)結(jié)果判定有一定的主觀性。


3反向間接血凝實(shí)驗(yàn)RIHA,是將特異性抗體與抗原連接到,適當(dāng)處理過的哺乳動(dòng)物紅細(xì)胞表面。通過抗體與抗原之間的特異性結(jié)合反應(yīng)介導(dǎo)血細(xì)胞的凝結(jié),從而達(dá)到檢測(cè)相應(yīng)抗原目的的一種簡便免疫學(xué)診斷技術(shù)。


4從鱗翅目昆蟲建立首株細(xì)胞后,對(duì)蝦組織細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù),昆蟲的組織培養(yǎng)研究進(jìn)一步活躍起來。


5發(fā)展對(duì)蝦組織培養(yǎng)技術(shù),不僅對(duì)深人研究對(duì)蝦病毒提供了方便,而且也為對(duì)蝦免疫學(xué)、遺傳學(xué)、細(xì)胞工程學(xué)等方面研究提供了有利條件。

 

6最后,由于目前還沒有控制對(duì)蝦病毒病的有效藥物,可利用組織培養(yǎng)篩選抗病毒藥物。利用對(duì)蝦組織培養(yǎng),還可以制備病毒疫苗及為核酸探針檢測(cè)病毒提供條件應(yīng)用T CID5來測(cè)定YBV 的感染滴CIDSO病毒滴定法度,被感染組織為用96孔組織培養(yǎng)板培養(yǎng)的蝦淋巴器官細(xì)胞。

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